血液肿瘤患者必读：淋巴细胞亚群检测的五大要点

来源：梅斯血液新前沿 检验医学网

淋巴细胞亚群中的T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤淋巴细胞及淋巴细胞功能亚群调节性T细胞是细胞免疫检测的常用指标，广泛用于血液肿瘤患者的免疫状态评估、疾病复发或转移风险预测及治疗指导等。

为了更加深刻的认识到淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中的作用、加强其检测过程的质量管理、促进其规范地应用于临床，《淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识》介绍了淋巴细胞亚群的检测方法，归纳总结了其对血液肿瘤筛查、复发转移预警及预后评估、合并感染风险预警、造血干细胞移植后免疫重建监测与移植物抗宿主病预防、嵌合抗原受体T细胞免疫治疗后监测、用药指导与疗效监测等方面的应用，并对血液肿瘤患者的监测方案与随访时机选择做出了推荐。小编特别整理五大项，供大家参考。

一、淋巴细胞亚群具体包括哪些？

淋巴细胞是构成人体免疫系统的主要细胞，根据淋巴细胞表面的标记物和功能可以分为许多不同的群体，包括CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+辅助/诱导T淋巴细胞、CD3+CD8+抑制/杀伤T淋巴细胞、CD3-CD19+B淋巴细胞、CD3-（CD16+CD56）+NK淋巴细胞（简称为TBNK）及CD3+CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞（Treg）等。
本共识中，将TBNK和Treg统称为淋巴细胞亚群。

二、在血液肿瘤中的临床意义

血液肿瘤初筛

我们知道，血液肿瘤包括多种类型，其中一些类型可表现为特定淋巴细胞亚群的增殖和分化异常，如急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性淋巴细胞增殖性疾病（CLPD）等。

肿瘤复发及转移预警及预后评估

肿瘤细胞逃脱免疫监视机制之一就是抑制免疫细胞，如Treg，其在多种血液肿瘤中比例增加，与恶性程度、转移倾向、复发率等预后指标密切相关。

合并感染风险预警

移植后免疫重建评估与GVHD的预防

其中，Treg可作为急性和慢性GVHD的生物标志物。

CAR-T治疗患者的规范化管理和评估

靶向药物、免疫抑制剂和化疗药物的疗效监测、治疗指导

三、淋巴细胞亚群检测的主要方法

流式细胞术（FCM）是临床上常用的淋巴细胞亚群检测方法，具体可参考《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》，注意事项有以下几点：

首选EDTA-K2抗凝真空管进行外周静脉血标本采集，并在24h内进行检测；

TBNK检测推荐的单抗为CD45、CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56；

Treg检测的单抗为CD4、CD25、CD3、CD127。

四、淋巴细胞亚群检测的参考区间

淋巴细胞亚群检测的结果报告内容通常包括CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞和NK细胞的相对计数（百分比）和绝对计数（绝对值）、CD4+/CD8+比值、Treg细胞占CD4+T细胞的百分比。
我国不同地区、年龄、民族健康人群的TBNK、Treg细胞参考区间见下表。

五、如何解读报告？

1. 出现以下情况，需结合临床进行血液肿瘤的筛查

B或NK淋巴细胞显著增高；

CD3+CD4+CD8+T淋巴细胞或CD3+CD4-CD8-T淋巴细胞明显增高；

CD4/CD8比值大于10:1或小于1:10；CD3+%+CD19+%+（CD16+CD56）+%明显大于或小于（100±5）%、CD4+%+CD8+%明显大于或小于CD3+%（变化范围为5%-10%）；

需排除标本、仪器、试剂及反应性改变等因素。

具体流程如下：

2.当血液肿瘤患者出现CD4+和CD8+T细胞减少、CD4+/CD8+比值降低、Treg细胞明显增加时，提示肿瘤复发和转移的风险增加；

当CD4+T淋巴细胞绝对计数＜500个/μL时，机会性感染风险会大幅升高；CD4＋T、CD8＋T淋巴细胞数量低下的淋巴瘤患者，化疗后感染风险明显升高；初诊时Treg细胞比例升高的血液肿瘤患者，感染率明显增加。

3.当移植患者免疫重建监测时，一般NK细胞恢复较快，移植后2-3周可恢复；CD3+CD8+T淋巴细胞1-3月恢复，CD3+CD4+T淋巴细胞1年以上；CD3-CD19+B淋巴细胞移植后恢复时间不定，短至3个月，长至1年半以上；Treg细胞在移植早期比例低，晚期逐渐增多。

4.当移植患者GVHD预防时，Treg细胞随GVHD等级的增加呈下降趋势；NK细胞迅速增加可能会促进急性GVHD发生。建议再移植患者早期植入阶段（输注后2-4周）、移植后早期阶段（输注后1-3月）、移植后晚期阶段（输注后3月以后）都行淋巴细胞亚群检测。

5.当用于CAR-T细胞增殖监测时，在回输CAR-T细胞后，通过FCM监测外周血CAR-T细胞的比例和数量，如CAR-T细胞（占淋巴细胞）、CD4+CAR-T细胞（占T淋巴细胞）和CD8+CAR-T细胞（占T淋巴细胞），从而监测CAR-T细胞增殖水平。建议连续监测患者CAR-T细胞回输前1天、回输后第4天、第7天、第14天、第28天外周血淋巴细胞亚群变化情况，及治疗后2个月、3个月、6个月随访。

6.除上述以外，在指导血液肿瘤患者药物治疗时，B细胞是否完全清除可用于评估CD20单抗的治疗反应和疗效；

对于免疫功能严重受损的患者，当CD4+T细胞绝对计数小于100个/μL时，应及时停用免疫抑制药；对于移植及个体化免疫治疗患者，当CD4+/CD8+细胞比值出现小于0.2时，应停用免疫抑制药。